date:2025-04-10 16:27:58
趨化性分析旨在分析某一細(xì)胞類型是否會直接朝著特定的趨化因子定向遷移。由于趨化性在癌癥發(fā)展和免疫細(xì)胞浸潤過程中尤為重要，因此在趨化性分析中常用的細(xì)胞類型為癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞。
趨化性分析可用于研究：
·目的基因敲除、敲低或過表達(dá)后細(xì)胞的趨化行為
·物質(zhì)的趨化潛力
·趨化抑制劑和增強(qiáng)劑的作用
·區(qū)分趨化性和化學(xué)誘導(dǎo)運(yùn)動（增強(qiáng)的細(xì)胞遷移）
·趨化過程中的細(xì)胞信號傳導(dǎo)
·趨化過程中細(xì)胞骨架的變化
在2D表面遷移的HT-1080 LifeAct-TagGFP2趨化性細(xì)胞
2D與3D趨化性分析
許多細(xì)胞自然生長于3D環(huán)境中。在體外培養(yǎng)時(shí)，細(xì)胞附著在平坦的2D表面上，其行為可能與處于3D凝膠基質(zhì)中時(shí)有所不同。在很多情況下，3D環(huán)境更接近體內(nèi)真實(shí)情況，因此在設(shè)計(jì)趨化性實(shí)驗(yàn)時(shí)需要考慮到這一點(diǎn)。
使用µ-Slide Chemotaxis趨化載玻片時(shí)，由于凝膠結(jié)構(gòu)不妨礙擴(kuò)散，可輕松在水基凝膠（如I型膠原凝膠和Matrigel）中建立趨化梯度。
顯微成像示意圖：2D表面貼壁的HT-1080癌細(xì)胞（左）
嵌入3D I型膠原凝膠的HT-1080癌細(xì)胞（右）
用于趨化性分析的腔室
已經(jīng)開發(fā)了幾種具有不同特性的腔室來進(jìn)行趨化性分析：
·µ-Slide Chemotaxis趨化載玻片
·Boyden Chamber（Transwell遷移實(shí)驗(yàn)）
·齊格蒙德小室（Zigmond Chamber）
·鄧恩小室（Dunn Chamber）
ibidi µ-Slide Chemotaxis趨化載玻片
·在ibidi µ-Slide Chemotaxis趨化載玻片中，細(xì)胞在連接兩個(gè)大儲液池的中央通道內(nèi)遷移并可被實(shí)時(shí)觀察到。
·可建立長期穩(wěn)定的線性梯度
·實(shí)驗(yàn)起始時(shí)細(xì)胞分布均勻
·適用于倒置顯微鏡活細(xì)胞成像
適用于：
·2D和3D分析
·快速和慢速遷移的細(xì)胞
·貼壁和非貼壁細(xì)胞
實(shí)驗(yàn)原理：細(xì)胞可培養(yǎng)于3D凝膠基質(zhì)或2D表面（圖示為3D凝膠中遷移細(xì)胞）
µ-Slide Chemotaxis的開發(fā)旨在研究快速或慢速遷移的、非貼壁或貼壁細(xì)胞在2D表面或3D凝膠基質(zhì)中的趨化行為。可以在超過48小時(shí)的時(shí)間內(nèi)觀察到細(xì)胞在穩(wěn)定線性濃度分布中的遷移。由于梯度可以快速建立，因此也可以測量快速遷移反應(yīng)（在不到30分鐘內(nèi)發(fā)生）。
使用µ-Slide Chemotaxis可以對各種細(xì)胞類型（如內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞）的遷移行為進(jìn)行詳細(xì)而明確的分析。
參考文獻(xiàn)：
Zengel P, et al. (2011) μ-Slide Chemotaxis: a new chamber for long-term chemotaxis studies. BMC Cell Biol 12:21. 10.1186/1471-2121-12-21.
Biswenger V, et al. (2018) Characterization of EGF-guided MDA-MB-231 cell chemotaxis in vitro using a physiological and highly sensitive assay system. PLoS One 13(9):e0203040. 10.1371/journal.pone.0203040.
Boyden Chamber（Transwell遷移實(shí)驗(yàn)）
·細(xì)胞從濾膜或多孔膜的一側(cè)遷移到另一側(cè)，也稱為Transwell細(xì)胞遷移分析
·終點(diǎn)分析：在分析Transwell遷移分析時(shí)，在膜的背面計(jì)數(shù)遷移細(xì)胞，因此無法分析細(xì)胞路徑
·陡峭的梯度
·起始細(xì)胞分布不均；細(xì)胞僅位于膜的一側(cè)
Zigmond Chamber
·細(xì)胞在連接兩儲液池的橋接區(qū)域玻璃蓋片上遷移生長和遷移
·生成線性梯度但穩(wěn)定性差
·起始細(xì)胞分布均勻
·需正置顯微鏡進(jìn)行延時(shí)成像
Dunn Chamber
·與Zigmond腔室相似
·生成線性梯度但穩(wěn)定性差
·起始細(xì)胞分布均勻
·需正置顯微鏡進(jìn)行延時(shí)成像
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